Introducción
Medir el grado de transferencia de inmunidad pasiva es fundamental para el correcto manejo de los terneros jóvenes. La inmunidad pasiva se determina por la cantidad de calostro consumido durante las primeras 24 horas después del nacimiento, la calidad del calostro y la capacidad del ternero para absorber IgG del intestino. Desafortunadamente, determinar el fallo de la transferencia pasiva (FTP) en la granja es difícil. La mayoría de los veterinarios coinciden en que el FTP se produce cuando la concentración sérica de IgG en los terneros es inferior a 10 gramos de IgG por litro de suero (o 1000 mg/dl de suero).
Medir la proteína total en la granja puede ser un desafío. Las pruebas disponibles para medirla suelen ser lentas, difíciles o costosas. Un método, la medición de la proteína total con un refractómetro, es una alternativa razonable a otros métodos. La Nota para Terneros n.° 39 contiene información importante sobre el uso de refractómetros.
Un comentario en Calf Note 39 decía: « La relación entre la proteína sérica total y la IgG cambia a medida que el ternero envejece ». Esto es cierto. El objetivo de esta Nota sobre Terneros es aclarar esta observación.
Experimento 1. Se adquirió un grupo de terneros (n = 72) de granjas lecheras y mercados locales y se transportó a la Unidad de Investigación de Terneros de APC en Ames, IA. Los terneros tenían entre 3 y 5 días de edad al llegar a las instalaciones, aunque no se registró la fecha de nacimiento exacta. Los terneros recibieron electrolitos al llegar y sustituto de leche del día 1 al día 3. El día 4, se recolectó una muestra de sangre yugular en recipientes al vacío que contenían EDTA, y el plasma se obtuvo por centrifugación. Posteriormente, se determinó la proteína total utilizando un refractómetro clínico (Schuco Clinical Refractometer). El refractómetro se calibró para la temperatura antes de cada muestra. La sangre restante se centrifugó y el plasma se almacenó (-30ºC) antes del análisis de IgG mediante inmunoensayo turbidimétrico y de proteína total mediante biuret utilizando un sistema de química automatizado (COBAS MIRA, Roche Diagnostic Systems, Somerville, NJ). Medimos la proteína total mediante el método de biuret para determinar si el refractómetro estaba midiendo eficazmente la proteína total en nuestras muestras.
Nuestra primera medición consistió en determinar si el refractómetro proporcionaba una medición precisa de la proteína total en las muestras de plasma. Para ello, comparamos las mediciones de proteína total realizadas con el refractómetro con las realizadas mediante el sistema de química de biuret (laboratorio). La correlación entre ambas mediciones fue de 0,92. Como se observa en la figura, existe una alta correlación entre ambos métodos de medición de la proteína total. Además, la ecuación de regresión (0,91X + 0,39) indica que, a medida que aumentaba la proteína total (estimada por biuret), se producía un aumento correspondiente en la proteína total estimada por el refractómetro. La tasa de aumento (0,91), o pendiente de la línea de regresión, es muy cercana a 1,0, lo que corresponde a un aumento de una unidad en la proteína estimada por el refractómetro por cada aumento de una unidad en la proteína total estimada por biuret. La intersección (0,39) también es cercana a cero, lo que significa que el refractómetro presenta un sesgo mínimo en comparación con el método de biuret.
Responder a la pregunta de la relación entre la proteína total y la IgG fue nuestro siguiente objetivo. En la segunda figura, se muestra la relación entre la proteína total, medida como biuret, y la IgG. El r² ( una medida de la variación en la IgG plasmática que es explicada por la proteína total) es ahora 0,58. Esto significa que aproximadamente el 58% de la variación en la IgG plasmática puede explicarse por la medición de la proteína total. Por otro lado, esto también significa que aproximadamente el 42% de la variación en la IgG plasmática NO es explicada por la proteína total. Del gráfico, es claro que algunos terneros sin IgG plasmática medible (IgG plasmática = 0) todavía tenían proteína en su torrente sanguíneo, aproximadamente 4,5 g/dL. Otros dos terneros tenían IgG plasmática muy baja (aproximadamente 1 g/L) pero > 6 g/dL de proteína total.
El gráfico final muestra la relación entre la IgG plasmática y la proteína total medida con el refractómetro. El coeficiente de determinación (r² ) de esta regresión es de tan solo 0,41, lo que significa que menos de la mitad de la variación en la concentración de IgG plasmática puede explicarse por la variación en la proteína total, según la estimación del refractómetro. Por el contrario, aproximadamente el 59 % de la variación en la IgG plasmática se debe a factores distintos de la proteína total, según la medición con el refractómetro.
¿Por qué la relación entre la proteína total (refractómetro) y la IgG plasmática es tan baja en este estudio? Bueno, tenemos algunas teorías para explicar esta observación:
- El refractómetro es intrínsecamente menos preciso que el método del biuret. El uso de un método automatizado como el del biuret (y el equipo que utilizamos para medir las proteínas) es más preciso debido al mayor control en la medición del ensayo. Por ello, el método del biuret ofreció una mejor predicción (r² = 0,58) que el refractómetro (r² = 0,41).
- La relación entre la IgG y las proteínas cambió. Los terneros de este estudio tenían entre 4 y 9 días de edad. Sin embargo, debido a que los terneros se adquirieron en mercados de ganado, no pudimos determinar la edad exacta de cada uno. A medida que los terneros envejecen, la relación entre la IgG plasmática y las proteínas totales en la sangre parece disminuir. Por lo tanto, en terneros mayores, el uso de un refractómetro es menos útil que en terneros muy jóvenes. El cambio en la relación entre la IgG y las proteínas totales puede deberse a varios factores:
- una disminución en la concentración de IgG plasmática debido a la pérdida de IgG. La pérdida de IgG (vida media) se debe al consumo normal de IgG en respuesta a la edad, la exposición a patógenos en el medio ambiente y otros factores.
- Cambio en las concentraciones de proteínas. La concentración de proteínas en la sangre depende de muchos factores, incluyendo la cantidad de calostro ingerido y la cantidad de proteínas consumidas. A medida que los terneros crecen, la cantidad de proteínas en la sangre depende menos de la cantidad de calostro y más de la cantidad de proteínas consumidas durante la alimentación normal.
Utilizando la ecuación del gráfico final, es posible ESTIMAR la concentración plasmática de IgG en terneros a partir de la proteína total medida con un refractómetro. Así es como funciona: supongamos que mide la proteína total en el plasma del ternero con su refractómetro y obtiene 6 g/dL. Según este estudio, la IgG plasmática estimada sería 6 * 4,98 – 18,92 = 10,96 g/L. Puede estimar cualquier número de mediciones con el refractómetro utilizando esta ecuación. Sin embargo, recuerde que la relación entre la medición del refractómetro y la IgG es solo del 41 %.
Muchos veterinarios utilizan un refractómetro y un valor límite de 5,5 g/dL para indicar la transferencia pasiva de inmunidad (TPI). Es decir, cuando los terneros tienen una proteína total superior a 5,5 g/dL, están adecuadamente protegidos, pero cuando la proteína total es inferior a 5,5 g/dL, no lo están lo suficiente. En este estudio, una proteína total de 5,5 g/dL se traduce en una concentración plasmática de IgG de 8,47 g/L, que generalmente se clasifica como demasiado baja. Para alcanzar una concentración de IgG de 10 g/L (que se clasifica como transferencia pasiva exitosa), la medición de la proteína total debe ser de 5,8 g/dL.
Los resultados de este estudio indican que la medición de la proteína total mediante refractómetro es más compleja que simplemente medir la proteína total en sangre y estimar la IgG. La edad del animal es muy importante. Estos datos sugieren que, cuando un ternero tiene más de 5 días de edad, la capacidad del refractómetro para estimar la FPT disminuye. Y a medida que los terneros envejecen, la utilidad del refractómetro seguirá decreciendo.
Las estimaciones de proteína total que indican FPT deben evaluarse cuidadosamente. En varias evaluaciones de investigación, la proteína total (medida con refractómetro) que se correlaciona con 10 g de IgG/L de plasma es superior a 5,5 g/dL.
Los terneros necesitan una cantidad adecuada de calostro lo antes posible para una vida sana y productiva. El refractómetro es una buena herramienta —si se usa correctamente— para estimar la calidad del programa general de alimentación con calostro. Conocer las limitaciones de una herramienta suele hacerla más útil. En el caso del refractómetro, medir la proteína total en la sangre de terneros menores de 5 días aumentará la probabilidad de tomar la decisión correcta con respecto al manejo del calostro.