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Introdução
Em nossa Calf Note anterior, exploramos por que a eficiência aparente de absorção (AEA) da imunoglobulina G (IgG) nunca é de 100%, enfatizando a troca dinâmica entre os espaços intra e extravasculares. Essa discussão destacou uma realidade importante: a AEA não é uma constante biológica fixa, mas sim uma estimativa calculada influenciada por diversos fatores fisiológicos e metodológicos.
Outro componente-chave da AEA é o volume plasmático (PV), que é usado para calcular a quantidade total de IgG absorvida pela circulação. O volume plasmático pode ser medido por meio de um dos diversos métodos disponíveis ou estimado com base no peso corporal (BW), pois foi demonstrado que o PV está altamente relacionado ao BW em muitas espécies animais. No entanto, a variação no PV é importante para nossa compreensão da AEA e — principalmente — para a variação no cálculo da AEA.
Volume plasmático: suposição x realidade
Na maioria dos estudos sobre transferência passiva, presume-se que o volume plasmático seja uma proporção fixa do PB, variando tipicamente entre 7% e 10% do PB. Essa suposição simplifica os cálculos da AEA, uma vez que o VP é necessário para converter a concentração sérica de IgG (g/L) na massa total de IgG circulante. No entanto, o VP não é fixo. Trata-se de uma variável biológica que muda com o estado de hidratação, a alimentação, a idade e a adaptação fisiológica após o nascimento. Tratar o PV como uma constante introduz erros nos cálculos da AEA — erros que podem ser substanciais, dependendo das condições.
Medição do volume plasmático: métodos e limitações
Pesquisadores têm utilizado diversas técnicas para estimar o volume plasmático em bezerros recém-nascidos, incluindo métodos de diluição com corante e métodos isotópicos.
Corante Evans Blue. A abordagem mais comum utiliza o corante Evans Blue (EBD), que se liga à albumina e, supõe-se, permanece no espaço vascular. Após a injeção, amostras de sangue são coletadas, e o PV é calculado com base na diluição. No entanto, esse método apresenta limitações, incluindo o tempo de equilíbrio. Normalmente, é utilizado um período de 10 minutos antes da coleta das amostras. Durante esse tempo, parte do corante pode sair do espaço vascular, ser metabolizado ou redistribuído. Portanto, muitos pesquisadores incluem um fator de correção para levar em conta essa perda de corante no período de equilíbrio (por exemplo, Quigley et al., 1998a).
Outros pesquisadores mediram repetidamente as concentrações de EBD após injetar a dose inicial no animal. Eles podem então traçar uma reta de regressão e estimar a quantidade no tempo zero (ou seja, a interceptação), o que corrige o erro de equilíbrio.
Outros pesquisadores utilizaram isótopos radioativos, como proteínas marcadas com131I (por exemplo, Möllerberg et al., 1975), para estimar o PV. É claro que essas abordagens são mais difíceis de manejar e não são mais comumente utilizadas.
A relação entre o peso vivo (BW) e o volume plasmático (PV) (em mililitros) em bezerros jovens é mostrada na Figura 1, que é de Quigley et al. (1998a).
Neste estudo, relatamos que o PV estava relacionado ao peso ao nascer, à raça (Holstein ou Jersey) e à idade na coleta da amostra. A equação de regressão foi:
PV = -2393,1 + 68,09 × PB + 404,1 × raça + 127,3 × idade
Onde PB é o peso ao nascer do bezerro, em kg; raça é 0 = Jersey, 1 = Holstein; idade = horas de vida. O r²da regressão = 0,60.
Geralmente, a relação entre o peso corporal (BW) e o volume plasmático (PV) é superior a 0,80; neste estudo, trabalhamos com bezerros de um dia de vida que apresentavam uma expansão rápida e variável do PV devido à ingestão de colostro e à absorção de grandes quantidades de proteína, gordura e lactose — fatores que podem influenciar a dinâmica dos fluidos corporais e o PV geral. Nossos dados — não ajustados para erro experimental — indicaram que o PV era de 9,9% do PB para bezerros da raça Holstein e de 9,71% do PB para bezerros da raça Jersey. Quando corrigidos para a perda de EBD durante o período de equilíbrio, os valores foram de 9,0% e 8,8% do PB, respectivamente.
Faixa dos volumes plasmáticos relatados
Uma revisão da literatura sobre colostro em bezerros mostra que os valores de PV estimados ou medidos variam tipicamente de ~7% do PB a >14% do PB. Curiosamente, Matte et al. (1982) alimentaram bezerros com uma dose de colostro às 6, 12, 24, 36 ou 48 horas de idade. Eles mediram o PV 6 horas após a alimentação e relataram que o PV, medido por meio do EBD, diminuiu de 14,5% do peso corporal (PB) quando medido às 12 horas de idade para 9,2% às 54 horas de idade. McEwan et al. (1968) relataram que o PV em bezerros (n = 5) que consumiram colostro aumentou de 6,6% para 9,3% do PB, e, nos bezerros alimentados com leite em vez de colostro, o PV aumentou de 6,3% para 8,7% do PB. Não houve diferença entre a alimentação com leite ou colostro, mas observou-se um grande efeito do consumo de líquido. O volume plasmático foi medido às 72 horas de idade neste estudo. Esse intervalo pode parecer modesto, mas seu impacto na AEA é significativo.
A Tabela 1 mostra uma amostra de estudos publicados e as faixas do PV relatadas. Fica claro que há uma variação significativa nas estimativas publicadas – de 5,3% a 14,5% do peso corporal (PC) como PV.
O impacto da alimentação e da hidratação no PV
O volume plasmático não é estático no bezerro recém-nascido — ele muda rapidamente após o nascimento, particularmente em resposta à alimentação.
Alguns fatores que influenciam a dinâmica de fluidos no bezerro, e, consequentemente, o PV, incluem líquidos de alimentação (colostro, leite, substituto do leite), que aumentam a ingestão de fluidos. A absorção de fluidos aumenta o PV e pode ocorrer poucas horas após a alimentação. Como resultado, um bezerro submetido à coleta de amostra às 24 horas pode apresentar um PV diferente do mesmo bezerro às 32 ou 48 horas. Alimentações adicionais (por exemplo, substituto do leite após o colostro) influenciam ainda mais o PV. Assim, a variação na forma como os bezerros são alimentados durante um ensaio de pesquisa introduz variabilidade adicional.
Isso significa que o PV no momento da coleta de sangue é um alvo em movimento.
Momento da coleta de sangue: outra camada de variação
O momento da medição da IgG sérica é outro fator crítico. Os horários comuns de coleta incluem 24, 28–32 horas e 48 horas. No entanto, esses momentos não são fisiologicamente equivalentes. Pode ocorrer absorção e redistribuição contínuas de IgG, e a PV pode aumentar devido à alimentação em andamento. A IgG absorvida pode migrar para compartimentos extravasculares em momentos de coleta posteriores. Parte da IgG pode ser metabolizada e filtrada pelos rins para excreção na urina.
Se os bezerros não forem manejados de maneira idêntica entre o nascimento e a coleta (por exemplo, diferenças na alimentação com substituto do leite após o colostro), a concentração sérica de IgG medida refletirá tanto a massa de IgG quanto o PV naquele momento, e as diferenças no PV podem obscurecer as verdadeiras diferenças na absorção de IgG.
Implicações para os cálculos da AEA
A AEA é normalmente calculada da seguinte forma:
AEA (%) = [IgG sérica (g/L) × Volume plasmático (L)] / Ingestão de IgG (g) × 100
Cada componente apresenta incerteza:
IgG sérica → influenciada pelo momento da coleta e pelo método analítico
Ingestão de IgG → frequentemente estimada, não medida diretamente
Volume plasmático → presumido ou medido de forma imperfeita
Dentre esses, o PV é frequentemente tratado como o mais “certo” — quando, na verdade, pode ser uma das maiores fontes de erro. A decisão de usar um fator específico para o PV (por exemplo, 7% vs. 10% do peso corporal) tem implicações nos valores finais.
A Tabela 2 mostra o efeito de calcular o PV como 10% do peso corporal (PC) em comparação com 5,5% do PC para um bezerro de 40 kg alimentado com 150 g de IgG e com uma concentração sérica de IgG de 15 g/L. A AEA calculada diminui de 40% para 22% simplesmente com base no fator de multiplicação selecionado. Essa é uma consideração importante para qualquer pesquisa que relate dados de absorção de IgG.
Resumindo
Ao interpretarmos os valores de AEA, devemos reconhecer que eles não são medições precisas, mas estimativas derivadas de um sistema biológico dinâmico.
A variação no volume plasmático decorre de:
- Diferenças biológicas entre bezerros
- Alimentação e estado de hidratação
- Momento da coleta de amostras
- Diferenças metodológicas na medição (por exemplo, corante versus isótopo, com correção versus sem correção)
- Suposições utilizadas nos cálculos
Esses fatores podem alterar significativamente a AEA calculada — mesmo quando a biologia subjacente à absorção de IgG permanece inalterada.
Pontos práticos a serem lembrados
- O volume plasmático não é uma constante; é uma variável dinâmica
- Os valores estimados de PV (7–9,8% do peso corporal) podem afetar significativamente a AEA calculada
- Os métodos utilizados para medir o PV (por exemplo, o corante azul de Evans) introduzem variabilidade
- O estado de alimentação e hidratação antes da coleta de amostras influencia o PV
- O momento da coleta de sangue acrescenta outra fonte de variação
- As diferenças na AEA entre os estudos podem refletir tanto a metodologia quanto a biologia
Recomendações de pesquisa
A seleção de um fator de PV deve levar em consideração a raça e o momento da alimentação e da coleta de amostras. Dados de Cabral et al. (2015) e Quigley et al. (1998a) sugerem que um fator de aproximadamente 9% do peso corporal (PC) para bezerros da raça Holstein coletados às 24 horas de vida é apropriado.
Os programas de alimentação devem ser rigorosamente controlados e relatados com precisão. Alimentações adicionais de colostro ou outros líquidos antes da coleta de sangue introduzirão variabilidade nos cálculos.
A coleta de amostras em um momento fixo – de preferência às 24,00 horas de idade para estudos de alimentação com colostro – ajudará a reduzir o erro nos cálculos do PV.
Se for utilizado o EBD, recomenda-se o fator de correção de 10 minutos de Quigley et al. (1998a), de 0,906.
Resumo
O volume plasmático é um componente crítico — mas frequentemente subestimado — dos cálculos da AEA. Como o PV é dinâmico e difícil de medir com precisão, ele introduz variabilidade inerente nas estimativas de absorção de IgG. Reconhecer as limitações das suposições e técnicas de medição do PV nos ajuda a interpretar melhor os valores de AEA — não como verdades fixas, mas como aproximações dentro de um sistema fisiológico complexo e em evolução.
Compreender e levar em conta o volume plasmático melhorará nossa capacidade de avaliar a transferência passiva e refinar a forma como interpretamos os dados de IgG sérica em bezerros recém-nascidos.
Referências
Cabral, R. G., C. E. Chapman, E. J. Kent e P. S. Erickson. 2015. Estimativa do volume plasmático em bezerros Holstein recém-nascidos alimentados com uma ou duas doses de um substituto de colostro à base de leite, utilizando corante azul de Evans e valores de hematócrito em diversos momentos. Can. J. Anim. Sci. 95:293-298.
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